食品中總汞的測(cè)定方法

　　1　主題內(nèi)容與適用范圍

　　本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了食品中總汞的測(cè)定方法。

　　本標(biāo)準(zhǔn)適用于食品中總汞的測(cè)定。

　　低檢出濃度：冷原子吸收光譜法：(一)壓力消解法為0.4μg/kg；(二)其他消解法為10μg/kg；第二法比色法為25μg/kg。

　　冷原子吸收光譜法

　　2　原理

　　汞蒸氣對(duì)波長(zhǎng)253.7nm的共振線具有強(qiáng)烈的吸收作用。樣品經(jīng)過(guò)酸消解或催化酸消解使汞轉(zhuǎn)為離子狀態(tài)，在強(qiáng)酸性介質(zhì)中以氯化亞錫還原成元素汞，以氮?dú)饣蚋稍锟諝庾鳛檩d體，將元素汞吹入汞測(cè)定儀，進(jìn)行冷原子吸收測(cè)定，在一定濃度范圍其吸收值與汞含量成正比，與標(biāo)準(zhǔn)系列比較定量。

　　(一)　壓力消解法

　　3　試劑

　　分析過(guò)程中全部用水均使用去離子水(電阻率在8×105Ω以上)，所使用的化學(xué)試劑均為分析純或優(yōu)級(jí)純。

　　3.1　硝酸。

　　3.2　鹽酸。

　　3.3　*(30%)。

　　3.4　硝酸(0.5＋99.5)：取0.5mL硝酸，慢慢加入50mL水中，然后加水稀釋至100mL。

　　3.5　高錳酸鉀溶液(50g/L)：稱取5.0g高錳酸鉀，置于100mL棕色瓶中，以水溶解稀釋至100mL。

　　3.6　硝酸—重鉻酸鉀溶液(5＋0.05＋94.5)：稱取0.05g重鉻酸鉀，溶于水中，加入5mL硝酸，用水稀釋至100mL。

　　3.7　氯化亞錫溶液(100g/L)：稱取10g氯化亞錫，溶于20mL鹽酸中，以水稀釋至100mL，臨用時(shí)現(xiàn)配。

　　3.8　無(wú)水氯化鈣。

　　3.9　汞標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液：準(zhǔn)確稱取0.1354g經(jīng)干燥器干燥過(guò)的HgO2，溶于硝酸重鉻酸鉀溶液中，移入100mL容量瓶中，以硝酸—重鉻酸鉀溶液稀釋至刻度。混勻。此溶液每毫升含1.0mg汞。

　　3.10　汞標(biāo)準(zhǔn)使用液：由1.0mg/mL汞標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液經(jīng)硝酸—重鉻酸鉀溶液稀釋成2.0，4.0，6.0，8.0，10.0ng/mL的汞標(biāo)準(zhǔn)使用液。臨用時(shí)現(xiàn)配。

　　4　儀器

　　所用玻璃儀器均需以硝酸(1＋5)浸泡過(guò)夜，用水反復(fù)沖洗，zui后用去離子水沖冼干凈。

　　4.1　雙光束測(cè)汞儀(附氣體循環(huán)泵、氣體干燥裝置、汞蒸氣發(fā)生裝置及汞蒸氣吸收瓶)。

　　4.2　恒溫干燥箱。

　　4.3　壓力消解器、壓力消解罐或壓力溶彈。

　　5　分析步驟

　　5.1　樣品預(yù)處理

　　5.1.1　在采樣和制備過(guò)程中，應(yīng)注意不使樣品污染。

　　5.1.2　糧食、豆類去雜質(zhì)后，磨碎，過(guò)20目篩，儲(chǔ)于塑料瓶中，保存?zhèn)溆谩?/span>

　　5.1.3　蔬菜、水果、魚類、肉類及蛋類等水分含量高的鮮樣用食品加工機(jī)或勻漿機(jī)打成勻漿，儲(chǔ)于塑料瓶中，保存?zhèn)溆谩?/span>

　　5.2　樣品消解(可根據(jù)實(shí)驗(yàn)室條件選用以下任何一種方法消解)

　　5.2.1　壓力消解罐消解法：稱取1.00～3.00g樣品(干樣、含脂肪高的樣品少于1.00g，鮮樣少于3.00g或按壓力消解罐使用說(shuō)明書稱取樣品)于聚四氟乙烯內(nèi)罐，加硝酸2～4mL浸泡過(guò)夜。再加*(30%)2～3mL(總量不能超過(guò)罐容積的1/3)。蓋好內(nèi)蓋，旋緊不銹鋼外套，放入恒溫干燥箱，120～140℃保持3～4h，在箱內(nèi)自然冷卻至室溫，用滴管將消化液洗入或過(guò)濾入(視消化后樣品的鹽分而定)10.0mL容量瓶中，用水少量多次洗滌罐，洗液合并于容量瓶中并定容至刻度，混勻備用；同時(shí)作試劑空白。

　　5.3　測(cè)定

　　5.3.1　儀器條件：打開(kāi)測(cè)汞儀，預(yù)熱1～2h，并將儀器性能調(diào)至*狀態(tài)。

　　5.3.2　標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：吸取上面配制的汞標(biāo)準(zhǔn)使用液2.0，4.0，6.0，8.0，10.0ng/mL各5.0mL(相當(dāng)于10.0，20.0，30.0，40.0，50.0ng汞)，置于測(cè)汞儀的汞蒸氣發(fā)生器的還原瓶中，分別加入1.0mL還原劑氯化亞錫(100g/L)，迅速蓋緊瓶塞，隨后有氣泡產(chǎn)生，從儀器讀數(shù)顯示的zui高點(diǎn)測(cè)得其吸收值，然后，打開(kāi)吸收瓶上的三通閥將產(chǎn)生的汞蒸氣吸收于高錳酸鉀溶液(50g/L)中，待測(cè)汞儀上的讀數(shù)達(dá)到零點(diǎn)時(shí)進(jìn)行下一次測(cè)定。并求得吸光值與汞質(zhì)量關(guān)系的一元線性回歸方程。

　　5.3.3　樣品測(cè)定：分別吸取樣液和試劑空白液各5.0mL，置于測(cè)汞儀的汞蒸氣發(fā)生器的還原瓶中，以下按5.3.2自“分別加入1.0mL還原劑氯化亞錫”起進(jìn)行。將所測(cè)得其吸收值，代入標(biāo)準(zhǔn)系列的一元線性回歸方程中求得樣液中汞含量。

　　6　計(jì)算

　　式中：X1——樣品中汞含量，μg/kg(μg/L)；

　　m1——測(cè)定樣品消化液中汞質(zhì)量，ng；

　　m2——試劑空白液中汞質(zhì)量，ng；

　　V1——樣品消化液總體積，mL；

　　V2——測(cè)定用樣品消化液體積，mL；

　　m3——樣品質(zhì)量或體積，g或mL。

　　結(jié)果的表述：報(bào)告算術(shù)平均值的二位有效數(shù)字。

　　7　允許差

　　相對(duì)相差≤20%。

　　(二)　其他消化法

　　8　試劑

　　除特別注明外，所用試劑均為分析純?cè)噭鶠槿ルx子水。

　　8.1　硝酸。

　　8.2　硫酸。

　　8.3　氯化亞錫溶液(300g/L)：稱取30g氯化亞錫(SnCl2·2H2O)，加少量水，并加2mL硫酸使溶解后，加水稀釋至100mL，放置冰箱保存。

　　8.4　無(wú)水氯化鈣：干燥用。

　　8.5　混合酸(1+1+8)：量取10mL硫酸，再加入10mL硝酸，慢慢倒入50mL水中，冷后加水稀釋至100mL。

　　8.7　高錳酸鉀溶液(50g/L)：配好后煮沸10min，靜置過(guò)夜，過(guò)濾，貯于棕色瓶中。

　　8.8　鹽酸羥胺溶液(200g/L)。

　　8.9　汞標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液：準(zhǔn)確稱取0.1354g于干燥器干燥過(guò)的HgCl2，加混合酸(1＋1＋8)溶解后移入100mL容量瓶中，并稀釋至刻度，混勻，此溶液每毫升相當(dāng)于1.0mg汞。

　　8.10　汞標(biāo)準(zhǔn)使用液：吸取1.0mL汞標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液，置于100mL容量瓶中，加混合酸(1＋1＋8)稀釋至刻度，此溶液每毫升相當(dāng)于10.0μg汞。再吸取此液1.0mL，置于100mL容量瓶中，加混合酸(1＋1＋8)稀釋至刻度，此溶液每毫升相當(dāng)于0.10μg汞，臨用時(shí)現(xiàn)配。

　　9　儀器

　　9.1　消化裝置。

　　9.2　測(cè)汞儀。附氣體干燥和抽氣裝置。

　　9.3　汞蒸氣發(fā)生器。

　　10　分析步驟

　　10.1　樣品消化

　　10.1.1　回流消化法

　　10.1.1.1　糧食或水分少的食品：稱取10.00g樣品，置于消化裝置錐形瓶中，加玻璃珠數(shù)粒，加45mL硝酸、10mL硫酸，轉(zhuǎn)動(dòng)錐形瓶防止局部炭化。裝上冷凝管后，小火加熱，待開(kāi)始發(fā)泡即停止加熱，發(fā)泡停止后，加熱回流2h。如加熱過(guò)程中溶液變棕色，再加5mL硝酸，繼續(xù)回流2h，放冷后從冷凝管上端小心加20mL水，繼續(xù)加熱回流10min，放冷，用適量水沖洗冷凝管，洗液并入消化液中，將消化液經(jīng)玻璃棉過(guò)濾于100mL容量瓶?jī)?nèi)，用少量水洗錐形瓶、濾器，洗液并入容量瓶?jī)?nèi)，加水至刻度，混勻。按同一方法做試劑空白試驗(yàn)。

　　10.1.1.2　植物油及動(dòng)物油脂：稱取5.00g樣品，置于消化裝置錐形瓶中，加玻璃珠數(shù)粒，加入7mL硫酸，小心混勻至溶液顏色變?yōu)樽厣缓蠹?0mL硝酸，裝上冷凝管后，以下按10.1.1.1自“小火加熱”起依法操作。

　　10.1.1.3　薯類、豆制品：稱取20.00g搗碎混勻的樣品(薯類須預(yù)先洗凈晾干)，置于消化裝置錐形瓶中，加玻璃珠數(shù)粒及30mL硝酸、5mL硫酸，轉(zhuǎn)動(dòng)錐形瓶防止局部炭化。裝上冷凝管后，以下按10.1.1.1自“小火加熱”起依法操作。

　　10.1.1.4　肉、蛋類：稱取10.00g搗碎混勻的樣品，置于消化裝置錐形瓶中，加玻璃珠數(shù)粒及30mL硝酸、5mL硫酸、轉(zhuǎn)動(dòng)錐形瓶防止局部炭化。裝上冷凝管后，以下按10.1.1.1自“小火加熱”起依法操作。

　　10.1.1.5　牛乳及乳制品：稱取20.00g牛乳或酸牛乳，或相當(dāng)于20.00g牛乳的乳制品(2.4g全脂乳粉、8g甜煉乳，5g淡煉乳)，置于消化裝置錐形瓶中，加玻璃珠數(shù)粒及30mL硝酸，牛乳或酸牛乳加10mL硫酸，乳制品加5mL硫酸，轉(zhuǎn)動(dòng)錐形瓶防止局部炭化。裝上冷凝管后，以下按10.1.1.1自“小火加熱”起依法操作。

　　10.1.2　V2O5消化法

　　本法適用于水產(chǎn)品、蔬菜、水果。

　　10.1.2.1　取可食部分，洗凈，晾干，切碎，混勻。取2.50g水產(chǎn)品或10.00g蔬菜、水果，置于50～100mL錐形瓶中，加50mgV2O5粉末，再加8mL硝酸，振搖，放置4h，加5mL硫酸，混勻，然后移至140℃砂浴上加熱，開(kāi)始作用較猛烈，以后漸漸緩慢，待瓶口基本上無(wú)棕色氣體逸出時(shí)，用少量水沖洗瓶口，再加熱5min，放冷，加5mL高錳酸鉀溶液(50g/L)，放置4h(或過(guò)夜)，滴加鹽酸羥胺溶液(200g/L)使紫色褪去，振搖，放置數(shù)分鐘，移入容量瓶中，并稀釋至刻度。蔬菜、水果為25mL，水產(chǎn)品為100mL。

　　按同一方法進(jìn)行試劑空白試驗(yàn)。

　　10.2　測(cè)定

　　10.2.1　用回流消化法制備的樣品消化液

　　10.2.1.1　吸取10.0mL樣品消化液，置于汞蒸氣發(fā)生器內(nèi)，連接抽氣裝置，沿壁迅速加入3mL氯化亞錫溶液(300g/L)，立即通過(guò)流速為1.0L/min的氮?dú)饣蚪?jīng)活性炭處理的空氣，使汞蒸氣經(jīng)過(guò)氯化鈣干燥管進(jìn)入測(cè)汞儀中，讀取測(cè)汞儀上zui大讀數(shù)，同時(shí)做試劑空白試驗(yàn)。

　　10.2.1.2　吸取0，0.10，0.20，0.30，0.40，0.50mL汞標(biāo)準(zhǔn)使用液(相當(dāng)0，0.01，0.02，0.03，0.04，0.05μg汞)，置于試管中，各加10mL混合酸(1＋1＋8)，以下按10.2.1.1自“置于汞蒸氣發(fā)生器內(nèi)”起依法操作，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

　　10.2.2　用V2O5消化法制備的樣品消化液

　　10.2.2.1　吸取10.0mL樣品消化液，以下按10.2.1.1的方法操作。

　　10.2.2.2　吸取0，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0mL汞標(biāo)準(zhǔn)使用液(相當(dāng)0，0.1，0.2，0.3，0.4，0.5μg汞)，置于6個(gè)50mL容量瓶中，各加1mL硫酸(1＋1)、1mL高錳酸鉀溶液(50g/L)，加20mL水，混勻，滴加鹽酸羥胺溶液(200g/L)使紫色褪去，加水至刻度混勻，分別吸取10.0mL(相當(dāng)0，0.02，0.04，0.06，0.08，0.10μg汞)，以下按10.2.1.1自“置于汞蒸氣發(fā)生器內(nèi)”起依法操作。繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

　　11　計(jì)算　

　　式中：X2——樣品中汞的含量，mg/kg；

　　m4——測(cè)定用樣品消化液中汞的質(zhì)量，μg；

　　m5——試劑空白液中汞的質(zhì)量，μg；

　　m6——樣品質(zhì)量，g；

　　V3——樣品消化液總體積，mL；

　　V4——測(cè)定用樣品消化液體積，mL。

　　結(jié)果的表述：報(bào)告算術(shù)平均值的二位有效數(shù)字。

　　12　允許差

　　相對(duì)相差≤15%。

　　第二篇　二硫腙比色法(第二法)

　　13　原理

　　樣品經(jīng)消化后，汞離子在酸性溶液中可與二硫腙生成橙紅絡(luò)合物，溶于CHCL3，與標(biāo)準(zhǔn)系列比較定量。

　　14　試劑

　　14.1　硝酸。

　　14.2　硫酸。

　　14.3　氨水。

　　14.4　CHCL3：不應(yīng)含有氧化物。

　　14.5　硫酸(1＋35)：量取5mL硫酸，緩緩倒入150mL水中，冷后加水至180mL。

　　14.6　硫酸(1＋19)：量取5mL硫酸，緩緩倒入水中，冷后加水至100mL。

　　14.7　鹽酸羥胺溶液(200g/L)：吹清潔空氣，除去溶液中含有的微量汞。

　　14.8　溴麝香草酚藍(lán)—乙醇指示液(1g/L)。

　　14.9　二硫腙－CHCL3溶液(0.5g/L)，保存冰箱中，必要時(shí)用下述方法純化。

　　稱取0.5g研細(xì)的二硫腙，溶于50mLCHCL3中，如不全溶，可用濾紙過(guò)濾于250mL分液漏斗中，用氨水(1＋99)提取三次，每次100mL，將提取液用棉花過(guò)濾至500mL分液漏斗中，用鹽酸(1＋1)調(diào)至酸性，將沉淀出的二硫腙用CHCL3提取2～3次，每次20mL，合并CHCL3層，用等量水洗滌二次，棄去洗滌液，在50℃水浴上蒸去CHCL3。精制的二硫腙置硫酸干燥器中，干燥備用，或?qū)⒊恋沓龅亩螂暧?00、200、100mLCHCL3提取三次，合并CHCL3層為二硫腙溶液。

　　14.10　二硫腙使用液：吸取1.0mL二硫腙溶液，加CHCL3至10mL，混勻。用1cm比色杯，以CHCL3調(diào)節(jié)零點(diǎn)，于波長(zhǎng)510nm處測(cè)吸光度(A)，用式(3)算出配制100mL二硫腙使用液(70%透光率)所需二硫腙溶液的毫升數(shù)(V)。　

　　14.11　汞標(biāo)準(zhǔn)溶液：準(zhǔn)確稱取0.1354g經(jīng)干燥器干燥過(guò)的HgCl2，加硫酸(1＋35)使其溶解后，移入100mL容量瓶中，并稀釋至刻度，此溶液每毫升相當(dāng)于1.0mg汞。

　　14.12　汞標(biāo)準(zhǔn)使用液：吸取1.0mL汞標(biāo)準(zhǔn)溶液，置于100mL容量瓶中，加硫酸(1＋35)稀釋至刻度，此溶液每毫升相當(dāng)于10.0μg汞。再吸取此液5.0mL于50mL容量瓶中，加硫酸(1＋35)稀釋至刻度，此溶液每毫升相當(dāng)于1.0μg汞。

　　15　儀器

　　15.1　消化裝置。

　　15.2　可見(jiàn)分光光度計(jì)。

　　16　分析步驟

　　16.1　樣品消化

　　16.1.1　糧食或水分少的食品：稱取20.00g樣品，置于消化裝置錐形瓶中，加玻璃珠數(shù)粒及80mL硝酸、15mL硫酸，轉(zhuǎn)動(dòng)錐形瓶，防止局部炭化。裝上冷凝管后，小火加熱，待開(kāi)始發(fā)泡即停止加熱，發(fā)泡停止后加熱回流2h。如加熱過(guò)程中溶液變棕色，再加5mL硝酸，繼續(xù)回流2h，放冷，用適量水洗滌冷凝管，洗液并入消化液中，取下錐形瓶，加水至總體積為150mL。按同一方法做試劑空白試驗(yàn)。

　　16.1.2　植物油及動(dòng)物油脂：稱取10.00g樣品，置于消化裝置錐形瓶中，加玻璃珠數(shù)粒及15mL硫酸，小心混勻至溶液變棕色，然后加入45mL硝酸，裝上冷凝管后，以下按16.1.1自“小火加熱”起依法操作。

　　16.1.3　蔬菜、水果、薯類、豆制品：稱取50.00g搗碎、混勻的樣品(豆制品直接取樣，其他樣品取可食部分洗凈、晾干)，置于消化裝置錐形瓶中，加玻璃珠數(shù)粒及45mL硝酸、15mL硫酸，轉(zhuǎn)動(dòng)錐形瓶，防止局部炭化。裝上冷凝管后，以下按16.1.1自“小火加熱”起依法操作。

　　16.1.4　肉、蛋、水產(chǎn)品：稱取20.00g搗碎混勻樣品，置于消化裝置錐形瓶中，加玻璃珠數(shù)粒及45mL硝酸、15mL硫酸，裝上冷凝管后，以下按16.1.1自“小火加熱”起依法操作。

　　16.1.5　牛乳及乳制品：稱取50.00g牛乳、酸牛乳，或相當(dāng)于50.00g牛乳的乳制品(6g全脂乳粉，20g甜煉乳，12.5g淡煉乳)，置于消化裝置錐形瓶中，加玻璃珠數(shù)粒及45mL硝酸，牛乳、酸牛乳加15mL硫酸，乳制品加10mL硫酸，裝上冷凝管，以下按16.1.1自“小火加熱”起依法操作。

　　17　測(cè)定

　　17.1　取16.1.1～16.1.5消化液(全量)，加20mL水，在電爐上煮沸10min，除去二氧化氮等，放冷。

　　17.2　于樣品消化液及試劑空白液中各加高錳酸鉀溶液(50g/L)至溶液呈紫色，然后再加鹽酸羥胺溶液(200g/L)使紫色褪去，加2滴麝香草酚藍(lán)指示液，用氨水調(diào)節(jié)pH，使橙紅色變?yōu)槌赛S色(PH1～2)。定量轉(zhuǎn)移至125mL分液漏斗中。

　　17.3　吸取0，0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0，6.0μL汞標(biāo)準(zhǔn)使用液(相當(dāng)于0，0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0，6.0μg汞)，分別置于125mL分液漏斗中，加10mL硫酸(1＋19)，再加水至40mL，混勻。再各加1mL鹽酸羥胺溶液(200g/L)，放置20min，并時(shí)時(shí)振搖。

　　17.4　于樣品消化液、試劑空白液及標(biāo)準(zhǔn)液振搖放冷后的分液漏斗中加5.0mL二硫蹤使用液，劇烈振搖2min，靜置分層后，經(jīng)脫脂棉將CHCL3層濾入1cm比色杯中，以CHCL3調(diào)節(jié)零點(diǎn)，在波長(zhǎng)490nm處測(cè)吸光度，標(biāo)準(zhǔn)管吸光度減去零管吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

　　18　計(jì)算　

　　式中：X3——樣品中汞的含量，mg/kg；

　　m7——樣品消化液中汞的質(zhì)量，μg；

　　m8——試劑空白液中汞的質(zhì)量，μg；

　　m9——樣品質(zhì)量，g。

　　結(jié)果的表述：報(bào)告算術(shù)平均值的二位有效數(shù)字。

　　19　允許差

　　相對(duì)相差≤10%。

　　附加說(shuō)明：

　　本標(biāo)準(zhǔn)由衛(wèi)生部衛(wèi)生監(jiān)督司提出。